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Antrag auf pkh Muster

July 11, 2020

PKH Fluorescent Cell Linker Kits ermöglichen eine stabile, reproduzierbare, fluoreszierende Zellbeschriftung. Patentierte Zelllinker-Technologie integriert aliphatische Reportermoleküle in die Zellmembran Lipid-Bilayer durch selektive Partitionierung.1 Drei fluoreszierende Linker stehen zur Verfügung. PKH2 und PKH67 sind grüne Fluorchrome mit Anregung (490 nm) und Emission (504 nm) ähnlich fluorescein, während PKH26, ein rotes Fluorchrom, Anregungseigenschaften (551 nm) und Emissionseigenschaften (567 nm) aufweist, die mit Rhodinin- oder Phycoerythrin-Detektionssystemen kompatibel sind. PKH26 kann auch durch die 488 nm Emission eines Argon-Ionen-Lasers angeregt werden. Die Linker sind physiologisch stabil und zeigen wenig bis gar keine toxischen Nebenwirkungen auf Zellsysteme. Beschriftete Zellen behalten sowohl biologische als auch proliferative Aktivität bei und eignen sich ideal für Zellverfolgungs- und Zell-Zell-Interaktionsstudien. Aufgrund des unspezifischen Etikettierungsmechanismus der Zelllinker wurden eine Vielzahl von Zelltypen erfolgreich beschriftet. Die Linker wurden sowohl auf tierische und pflanzliche Zellen als auch auf andere membranhaltige Partikel angewendet. Das Muster der Färbung hängt von der Beschriftung des Zelltyps und der Membran der Zellen ab.2 Obwohl sich die meisten Anwendungen um allgemeine Etikettierungsmethoden (GL) mit Membranintegration der Sonden drehen, können die Linker auch für die selektive phagozytische Zellbeschriftung (PCL) verwendet werden. Das Aussehen der markierten Zellen kann von der hellen “Immunfluoreszenz”-Kennzeichnung bis hin zu einem punktuellen oder fleckigen Aussehen variieren. Da die Etikettierung keine Sättigungsreaktion ist, sondern eine Funktion sowohl der Farbstoff- als auch der Zellkonzentration, ist es wichtig, dass die für die Aufnahme verfügbare Farbmenge begrenzt wird. Eine Überetikettierung der Zellen führt zu einem Verlust der Membranintegrität und der Zellrückgewinnung.

Um eine lose Kopplung zu gewährleisten, verfügt jeder Dienst über eine eigene Datenbank. Die Aufrechterhaltung der Datenkonsistenz zwischen Diensten ist eine Herausforderung, da zwei Phasen-Commit/verteilte Transaktionen für viele Anwendungen keine Option sind. Eine Anwendung muss stattdessen das Saga-Muster verwenden. Ein Dienst veröffentlicht ein Ereignis, wenn sich seine Daten ändern. Andere Dienste nutzen dieses Ereignis und aktualisieren ihre Daten. Es gibt mehrere Möglichkeiten, Daten zuverlässig zu aktualisieren und Ereignisse zu veröffentlichen, einschließlich Event Sourcing und Transaction Log Tailing. Es gibt viele Muster, die mit dem Microservices-Muster zusammenhängen.